诊断学理论与实践››2012,Vol. 11››Issue (05): 476-480.doi:10.16150/j.1671-2870.a0569

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免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌方法的建立

古丽仙·吐尔逊, 顾志冬, 陈长强, 周敏, 卫蓓文, 张海晨, 费凤英, 樊绮诗,

  1. 开云网页登录 医学院附属瑞金医院检验科;开云网页登录 医学院附属瑞金医院微生物科;开云网页登录 医学院附属瑞金医院医学检验系;上海市徐汇区中心医院检验科;上海复旦大学附属青浦中心医院检验科;
  • 出版日期:2012-10-25发布日期:2012-10-25

    • Online:2012-10-25Published:2012-10-25

    摘要:目的:建立一种基于免疫磁性微球富集的检测结核分枝杆菌的新方法 ,以提高其临床阳性检出率。方法:提取结核分枝杆菌H37Rv抗原,并免疫新西兰白兔,制备兔抗结核分枝杆菌H37Rv血清。分离纯化抗血清,采用酶联免疫吸附试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定抗体的效价和纯度。将抗结核分枝杆菌抗体与生物素标记,并与结合有链霉亲和素的磁性微球进行连接获得免疫磁性微球,优化反应条件,建立免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌的方法。以培养结果作为判断金标准,比较免疫磁性微球富集方法与常规涂片镜检方法的检出率。结果:制备的抗结核分枝杆菌抗体浓度为14 mg/mL,最终效价为1∶20 000。检测158例临床标本,免疫磁性微球富集方法可使涂片镜检阳性率从5.1%提高到13.9%。22例免疫磁性微球富集后涂片镜检阳性的标本培养均为阳性,其特异度为100%。结论:建立的免疫磁性微球富集方法简便、有效,能显著提高结核分枝杆菌镜检的灵敏度和特异度。

    关键词:结核分枝杆菌,免疫磁性微球,磁性分离富集,涂片镜检,培养

    Key words:Mycobacterium tuberculosis,Immunomagnetic beads,Immunomagnetic beads separation,Smear detection,Culture

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