摘要：
目的探讨炎症微环境作用下骨形态发生蛋白－细胞外信号调节激酶５ （ Ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎｓ －ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ ５，ＢＭＰｓ－ＥＲＫ５）信号通路对人牙周膜干细胞（ Ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｌｉｇａｍｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ｈＰＤＬＳＣｓ）成骨分化的影响。
方法应用组织块酶消化法分离获得原代ｈＰＤＬＳＣｓ并进行体外培养，应用细胞免疫荧光染色鉴定ｈＰＤＬＳＣｓ。将腺病毒载体介导的骨形态发生蛋白２（ Ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ ２，ＢＭＰ２）、ＢＭＰ７及ＢＭＰ９蛋白（Ａｄ－ＢＭＰ２、Ａｄ－ ＢＭＰ７及Ａｄ － ＢＭＰ９）分别转染ｈＰＤＬＳＣｓ，定性和定量检测早期成骨分化指标碱性磷酸酶（ Ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ，ＡＬＰ），茜素红染色检测晚期成骨分化指标钙盐结节沉积，ｑＲＴ－ＰＣＲ检测成骨分化相关基因ｍＲＮＡ的表达。确定ＢＭＰ９对细胞成骨分化作用最强后，使用Ａｄ－ＢＭＰ９转染ｈＰＤＬＳＣｓ，检测其对ＥＲＫ５磷酸化（ｐ－ＥＲＫ５）水平的影响，并加入ＢＭＰｓ－ＥＲＫ５信号通路特异性抑制剂ＢＩＸＯ２１８９预处理，考察对ｈＰＤＬＳＣｓ成骨分化的影响。结果早期成骨分化、成骨分化相关基因及晚期成骨分化指标均显示，Ａｄ－ＢＭＰ２、Ａｄ－ＢＭＰ７及Ａｄ－ＢＭＰ９具有较强的ｈＰＤＬＳＣｓ成骨分化作用，Ａｄ－ＢＭＰ９促进ｈＰＤＬＳＣｓ成骨分化的作用最强。在ＥＲＫ５信号通路特异性抑制剂ＢＩＸ０２１８９干扰下，ＥＲＫ５表达降低，Ａｄ－ＢＭＰ９的ｈＰＤＬＳＣｓ成骨分化作用也被抑制，且呈ＢＩＸ０２１８９剂量依赖性趋势。
结论在慢性炎症微环境下，ＢＭＰ９具有诱导ｈＰＤＬＳＣｓ成骨分化的作用，ＥＲＫ５信号通路可调节ＢＭＰ９诱导的ｈＰＤＬＳＣｓ的成骨分化作用。
